DNaasi I (Rnase-vapaa) (2u/ul)
Kissanumero: HC4007B
DNaasi I on endonukleaasi, joka pystyy pilkkomaan yksi- tai kaksijuosteista DNA:ta.Se voi hydrolysoida fosfodiesterisidoksia tuottaakseen mono- ja oligodeoksinukleotideja, jotka sisältävät 5'-fosfaattiryhmän ja 3'-OH-ryhmän.DNaasi I:n optimaalinen pH-alue on 7-8.DNaasi I:n aktiivisuus riippuu Ca2+ja ne voidaan aktivoida kaksiarvoisilla metalli-ioneilla, kuten CO2, Mn2+, Zn2+jne. Mg:n läsnä ollessa2+, DNaasi I voi satunnaisesti katkaista minkä tahansa kaksijuosteisen DNA:n kohdan;Kun Mn2+, DNaasi I voi pilkkoa DNA:n kaksijuosteisena samasta kohdasta muodostaen tylpäitä tai tahmeita päitä 1-2 nukleotidin ulkoneessa.Sitä voidaan käyttää erilaisten RNA-näytteiden käsittelyyn.
Komponentit
| Nimi | 1KU | 5KU |
| Rekombinantti DNaasiI (RNaasi-vapaa) | 500 μl | 5 × 500 μl |
| DNAase I -reaktiopuskuri (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Varastointiolosuhteet
Tämä tuote tulee säilyttää -25 ~ -15 ℃ lämpötilassa 2 vuotta.Vältä toistuvaa jäätymistä ja sulattamista.
Ohjeet
Sovelletaan DNA:n poistamiseen RNA-näytteistä vain viitteeksi.
1. Käytä RNaasi-vapaita sentrifugiputkia ja pipetinkärkiä seuraavan reaktiojärjestelmän valmistukseen:
| Komponentit | Tilavuus (μL) |
| DNAase I -reaktiopuskuri (10×) | 1 |
| Rekombinantti-DNasel (RNaasi-vapaa) | 1 |
| RNA | X |
| RNaasi-vapaa ddH2O | Jopa 10 |
2. Reaktio-olosuhteet ovat seuraavat: 37 ℃, 15-30 minuutin kuluttua, lisää lopullinen pitoisuus 2,5 mM EDTA-liuosta ja sekoita hyvin, sitten 65 ℃ 10 minuuttia.Käsiteltyä templaattia voidaan käyttää myöhemmissä RT-PCR- tai RT-qPCR-kokeissa jne.
Huomautuksia
1. DNaasi l on herkkä fysikaaliselle denaturaatiolle;Kun sekoitat, käännä koeputki varovasti taaksepäin jaravista hyvin, älä ravista voimakkaasti.
2. Entsyymi tulee säilyttää jäälaatikossa tai jäähauteessa, kun sitä käytetään, ja se tulee säilyttää -20 ℃:ssa välittömästi käytön jälkeen.
3. Tämä tuote on tarkoitettu vain tutkimuskäyttöön.
4. Käytä turvallisuutesi vuoksi laboratoriotakkeja ja kertakäyttökäsineitä.
