Poly A -kantaja-RNA
Cat nro: HC4001A
Poly A, polyadenylaatti, on seos 100 ~ 10 000 polyadenylaattia, joka polymeroidaan polynukleotidifosforylaasilla in vitro.In vivo poly(a) lisätään mRNA:n 3-päähän entsyymillä mRNA:n stabiilisuuden parantamiseksi.Nukleiinihappouuttoa käytettäessä poly A:n lisääminen lysaattiin tai sitoutumisliuokseen voi parantaa DNA:n ja RNA:n saantoa.Mekanismipoly A:n nukleiinihapon saantoa parantava vaikutus on seuraava:
1. Kyllästynyt kosketus esineiden pintaadsorption kanssa.Useimpien polypropeenituotteiden pinnalla on staattista sähköä, joka adsorboi nukleiinihappoja.Kantaja-RNA voi kyllästää nämäadsorptiovaikutuksia ja vähentää kohdenukleiinihappojen häviämistä.
2. Inaktivoi jälkinukleaasit: Biologisissa näytteissä on erilaisia nukleaaseja jaympäristöön.Poly A voi inaktivoida jälkinukleaaseja uutto- tai säilytysvaiheissaparantaa kohdenukleiinihappojen saantoa ja stabiilisuutta.
3. Yhteisaostus: Alkoholivälitteisen saostuksen tai sitoutumisen nukleiinihapon puhdistusvaiheessa poly A voi saostua yhdessä kohdenukleiinihapon kanssa tai muodostaa polymeeripartikkeleitaparantaa palautumista.
Varastointiolosuhteet
-20 ~ 8 ℃, kuivavarastointi, pitkäaikainen varastointi tulee sijoittaa -20 ℃
Erittely
CAS-numero | 26763-19-9 |
Ulkomuoto | Valkoinen lyofilisoitu jauhe |
Puhtaus | 99 % |
Molekyylipaino | 700-3500 KDa |
Käyttötapa
Ota sopiva määrä lyofilisoitua jauhetta, lisää DEPC-käsiteltyä vettä tai guanidiinisuolaaliuotetaan se 0,1-1 ug/uL:aan ja pakkaa se sitten ja säilytä -20 °C:ssa.
Sovellukset
1. Virus-DNA/RNA-uutto: 1-5 ug:n kantaja-RNA:n lisääminen lysaattiin voi parantaa RNA:n/DNA:n saantoa, stabiloida kohdenukleiinihappoa ja välttää puhdistetun nukleiinihapon hajoamisen varastoinnin aikana.
2. Mikro-DNA/RNA-uutossa kolonnikalvomenetelmällä (<1 ug) kantaja-RNA:n lisääminen 1-5 ug:aan edistää nukleiinihapon saannon parantamista.
3. Alkoholivälitteisessä nukleiinihapon saostus- ja konsentrointivaiheessa 1-2 ug:n kantaja-RNA:n lisääminen auttaa parantamaan lyhyen segmentin RNA:n talteenottoa.
4. Kvantitatiivisessa koetin-PCR-reaktioliuoksessa 10-100 ng kantaja-RNA:n lisääminen reaktioliuokseen auttaa parantamaan herkkyyttä ja vähentämään C:tä.Tarvo.