Virus DNA/RNA Extraction Kit
Tämä pakkaus soveltuu erittäin puhtaan virus-DNA/RNA:n nopeaan erottamiseen näytteistä, kuten nenänielun vanupuikoista, ympäristöstä otettuista vanupuikoista, soluviljelmien supernatanteista ja kudoshomogenaattisupernatanteista.Sarja perustuu piidioksidikalvon puhdistusteknologiaan, joka eliminoi tarpeen käyttää fenoli/kloroformi orgaanisia liuottimia tai aikaa vievää alkoholisaostusta korkealaatuisen virus-DNA/RNA:n erottamiseen.Saadut nukleiinihapot ovat vapaita epäpuhtauksista ja valmiita käytettäviksi alavirran kokeissa, kuten käänteistranskriptio, PCR, RT-PCR, reaaliaikainen PCR, seuraavan sukupolven sekvensointi (NGS) ja Northern blot.
Varastointiolosuhteet
Säilytä 15 ~ 25 ℃ ja kuljeta huoneenlämmössä
Komponentit
| Komponentit | 100RXNS |
| Puskuri VL | 50 ml |
| Puskuri RW | 120 ml |
| RNaasi-vapaa ddH2O | 6 ml |
| FastPure RNA -kolonnit | 100 |
| Keräysputket (2 ml) | 100 |
| RNaasittomat keräysputket (1,5 ml) | 100 |
Puskuri VL:Tarjoa ympäristö lyysille ja sitoutumiselle.
Puskuri RW:Poista jäännösproteiinit ja muut epäpuhtaudet.
RNaasi-vapaa ddH2O:Eluoi DNA/RNA spinkolonnin kalvosta.
FastPure RNA -kolonnit:Adsorboi erityisesti DNA/RNA.
Keräysputket 2 ml:Kerää suodos.
RNaasi-vapaat keräysputket 1,5 ml:Kerää DNA/RNA.
Sovellukset
Nenänielun vanupuikkoja, ympäristöstä otettuja vanupuikkoja, soluviljelmien supernatantit ja kudoshomogenaattien supernatantit.
Itse valmistettu materiaaliials
RNaasi-vapaat pipetinkärjet, 1,5 ml:n RNaasi-vapaat sentrifugiputket, sentrifugi, vortex-sekoitin ja pipetit.
Kokeiluprosessi
Suorita kaikki seuraavat vaiheet bioturvallisuuskaapissa.
1. Lisää 200 μl näytettä RNaasi-vapaaseen sentrifugiputkeen (täytetään PBS:llä tai 0,9 % NaCl:lla, jos näytettä ei ole riittävästi), lisää 500 μl puskuria VL, sekoita hyvin vorteksoimalla 15–30 sekuntia ja sentrifugoi. lyhyesti, jotta seos kerääntyy putken pohjalle.
2. Aseta FastPure RNA -kolonnit keräysputkiin 2 ml.Siirrä seos vaiheesta 1 FastPure RNA -kolonniin, sentrifugoi nopeudella 12 000 rpm (13 400 x g) 1 minuutin ajan ja hävitä suodos.
3. Lisää 600 μl puskuria RW FastPure RNA -kolonneihin, sentrifugoi nopeudella 12 000 rpm (13 400 × g) 30 sekunnin ajan ja hävitä suodos.
4. Toista vaihe 3.
5. Sentrifugoi tyhjää kolonnia nopeudella 12 000 rpm (13 400 × g) 2 minuuttia.
6. Siirrä FastPure RNA -kolonnit varovasti uusiin RNaasi-vapaisiin keräysputkiin 1,5 ml (toimitetaan pakkauksessa) ja lisää 30–50 μl RNaasi-vapaata ddH2O:ta kalvon keskelle koskematta pylvääseen.Anna seistä huoneenlämmössä 1 minuutin ajan ja sentrifugoi 12 000 rpm (13 400 × g) 1 minuutin ajan.
7. Hävitä FastPure RNA -kolonnit.DNA/RNA:ta voidaan käyttää suoraan seuraaviin määrityksiin tai säilyttää -30 - -15 °C:ssa lyhyen aikaa tai -85 - -65 °C:ssa pidemmän aikaa.
Huomautuksia
Vain tutkimuskäyttöön.Ei käytettäväksi diagnostisissa toimenpiteissä.
1. Tasaa näytteet huoneenlämpötilaan etukäteen.
2. Virukset ovat erittäin tarttuvia.Varmista, että kaikki tarvittavat turvatoimenpiteet on tehty ennen koetta.
3. Vältä toistuvaa näytteen jäädyttämistä ja sulattamista, koska tämä voi johtaa erotetun virus-DNA/RNA:n hajoamiseen tai vähentymiseen.
4. Itse valmistetut laitteet sisältävät RNaasi-vapaat pipetinkärjet, 1,5 ml:n RNaasi-vapaat sentrifugiputket, sentrifugin, vortex-sekoittimen ja pipetit.
5. Kun käytät sarjaa, käytä laboratoriotakkia, kertakäyttöisiä lateksikäsineitä ja kertakäyttöistä maskia ja käytä RNaasi-vapaita tarvikkeita minimoidaksesi RNaasi-kontaminaation riskin.
6. Suorita kaikki vaiheet huoneenlämmössä, ellei toisin mainita.
Mekanismi ja työnkulku
