Fosfataasi alkalinen (ALP) – Biokemiallinen diagnostiikka Featured Image

Alkalinen fosfataasi (ALP)

Tapausnro: 9001-78-9

EY-nro: 3.1.3.1

Pakkaus: 100 µl, 500 µl, 10 ml, 100 ml, 1000 ml

Lähetä kysely

Tuotteen Kuvaus

Kuvaus

Alkalinen fosfataasi on peräisin rekombinantista E. coli -kannasta, joka kantaa TAB5-geeniä.Entsyymi katalysoi DNA- ja RNA-fosfomonoesterien 5'- ja 3'-päiden defosforylaatiota.Se myös hydrolysoi riboosia sekä deoksiribonukleosiditrifosfaatteja (NTP:t ja dNTP:t).TAB5 Alkalinen fosfataasi vaikuttaa 5´ ulkoneviin, 5´ upotettuihin ja tylppoihin päihin.Fosfataasia voidaan käyttää monissa molekyylibiologian sovelluksissa, kuten kloonauksessa tai koettimen päiden leimaamisessa DNA:n tai RNA:n fosforyloituneiden päiden poistamiseksi.Kloonauskokeissa defosforylaatio estää linearisoitua plasmidi-DNA:ta itseligoitumasta.Se voi myös hajottaa sitoutumattomia dNTP:itä PCR-reaktioissa valmistaakseen templaatin DNA-sekvensointia varten.Entsyymi inaktivoituu kokonaan ja palautumattomasti kuumentamalla 70 °C:ssa 5 minuuttia, jolloin fosfataasin poistaminen ennen ligaatiota tai loppuleimausta on tarpeetonta.

Käyttö

1. Proteiineihin (vasta-aineet, streptavidiini jne.) kytketty alkalinen fosfataasi voi spesifisesti tunnistaa kohdemolekyylejä, ja sitä voidaan käyttää ELISA-, WB- ja histokemiallisessa havaitsemisessa;
2. Alkalista fosfataasia voidaan käyttää defosforisoimaan DNA:n tai RNA:n 5'-päästä itseliittymisen estämiseksi;
3. Yllä oleva defosforyloitu DNA tai RNA voidaan leimata radioleimatuilla fosfaateilla (T4-polynukleotidikinaasin kautta)

Kemiallinen rakenne

Erittely

Testikohteet	Tekniset tiedot
Entsyymiaktiivisuus	5U/μl
Endonukleaasiaktiivisuus	Ei havaittu
Eksonukleaasiaktiivisuus	Ei havaittu
Nicking-toiminta	Ei havaittu
RNase-aktiivisuus	Ei havaittu
E. colin DNA	≤1 kopio/5U
Endotoksiini	LAL-testi, ≤10EU/mg
Puhtaus	≥ 95 %