Peroksidaasi (Piparjuurilähde) Synonyymi: Vetyperoksidioksidoreduktaasi;HRP

Piparjuuriperoksidaasi (HRP) eristetään piparjuuren (Amoracia rusticana) juurista ja kuuluu peroksidaasien ferroprotoporfyriiniryhmään.HRP yhdistyy helposti vetyperoksidin (H2O2) kanssa.Tuloksena oleva [HRP-H2O2] -kompleksi voi hapettaa monenlaisia ​​vedyn luovuttajia:
Luovuttaja + H2O2 → Hapetettu luovuttaja + 2 H2O
HRP hapettaa erilaisia ​​substraatteja (katso taulukko 1):
• Kromogeeninen
• Kemiluminoiva (kuten luminoli tai isoluminoli)
• Fluorogeeninen (kuten tyramiini, homovanilliinihappo tai 4-hydroksifenyylietikkahappo)
HRP on yksiketjuinen polypeptidi, joka sisältää neljä disulfidisiltaa.HRP on glykoproteiini, joka sisältää 18 % hiilihydraattia.Hiilihydraattikoostumus koostuu galaktoosista, arabinoosista, ksyloosista, fukoosista, mannoosista, mannosamiinista ja galaktosamiinista riippuen spesifisestä isotsyymistä.

HRP on laajalti käytetty immunoglobuliinien leima monissa erilaisissa immunokemian sovelluksissa, mukaan lukien immunoblottaus, immunohistokemia ja ELISA.HRP voidaan konjugoida vasta-aineisiin useilla eri menetelmillä, mukaan lukien glutaraldehydi, perjodaattihapetus, disulfidisidosten kautta sekä amino- ja tiolisuuntautuneiden silloittajien kautta.HRP on halutuin vasta-aineleima, koska se on pienin ja stabiilin kolmesta suosituimmasta entsyymileimosta (peroksidaasi, β-galaktosidaasi, alkalinen fosfataasi) ja sen glykosylaatio johtaa alhaisempaan epäspesifiseen sitoutumiseen.Katsaus glutaraldehydi- ja perjodaattikonjugaatiomenetelmistä on julkaistu.

Peroksidaasia käytetään myös glukoosin4 ja peroksidien määrittämiseen liuoksessa.Useat julkaisut, 6-24 opinnäytetyötä, 25-29 ja väitöskirjat 30-46 ovat viitanneet P8375:n käyttöön tutkimusprotokollissaan.