BsaI-restriktioendonukleaasi
Kuvaus
Bsal-restriktioentsyymi on tyypin II restriktioendonukleaasi, joka on peräisin E. colin ekspressoiman Bacillus sphaericus -bakteerin BspQI-geenin koodaamasta rekombinanttiproteiinista.Restriktioendonukleaaseja käytetään laajasti geenikartoituksissa, kloonauksessa ja muilla aloilla.Tämä entsyymi katkaisee DNA:n nopeasti tehokkaan geenin linearisoimiseksi. Bsal, IIs-restriktioendonukleaasirestriktioendonukleaasi, on peräisin rekombinantista E. coli -kannasta, joka kantaa Bacillus stearothermophilus -bakteerin kloonattua ja modifioitua Bsal-geeniä.joilla on sama spesifisyys kuin alkuperäisillä entsyymeillä ja heikentynyt tähtiaktiivisuus.Sen tunnistussekvenssi ja katkaisukohdat ovat seuraavat:
5'·······GGTTC(N)········3'
3'······CCAGAG(NNNNN)·······5'
Kemiallinen rakenne
Tuotteen ominaisuudet
• Restriktioendonukleaasilla on korkea entsymaattinen aktiivisuus ja se suorittaa ruoansulatusreaktion nopeasti.
• Alhainen epäspesifinen endonukleaasiaktiivisuus varmistaa tarkan "veikaleikkauksen".
• Ei BSA-järjestelmää, mikä vähentää lämmönlähteen aiheuttamaa saastumista.
Erittely
Testikohteet | Tekniset tiedot |
Entsyymiaktiivisuus | 20 U/µl |
Puhtaus (SDS-PAGE) | ≥ 95 % |
Rnase | Ei havaittu |
Ei-spesifinen DNAase-aktiivisuus | Ei havaittu |
Tähtitoiminta | Ei havaittu |
Ligaatio ja leikkaus | Digestion jälkeen DNA-fragmentit voidaan ligatoida.Ja nämä ligatoidut fragmentit voidaan leikata uudelleen Bsal:lla. |
Endotoksiinit (LAL-testi) | ≤10 EU/mg |
E. coli DNA | ≤1 kopio/2U |
Laadunvalvonta
Puhtaus ≥ 95 %, ei DNaasia, RNaasiaktiivisuus, isäntä-DNA-tähde ≤ 100 pg/mg, isäntäproteiinijäännös ≤ -50 ppm, endotoksiinijäännös ≤ 10EU/mg, ei proteaasiaktiivisuutta, steriili, vapaa mykoplasmasta
Sovellus
Pilko plasmidi linearisoidun DNA-fragmentin valmistamiseksi poly-päässä (A/T/C/G);
Linearisoi plasmiditemplaatti ennen in vitro -transkriptiota;
Rajoitus digest;
Yksikön määritelmä
Yksi yksikkö määritellään entsyymimääräksi, joka tarvitaan sulattamaan 1 µg sisäistä kontrolli-DNA:ta 1 tunnissa 37 °C:ssa 50 µl:n kokonaisreaktiotilavuudessa.
Kuljetus ja varastointi
Kuljetus:Toimitetaan alle -15°C
Varastointi:Säilytä -25--15°C
Suositeltu uudelleentestauksen kesto:1 vuosi