Alkalinen fosfataasi (ALP)

Alkalinen fosfataasi on peräisin rekombinantista E. coli -kannasta, joka kantaa TAB5-geeniä.Entsyymi katalysoi DNA- ja RNA-fosfomonoesterien 5'- ja 3'-päiden defosforylaatiota.Lisäksi se hydrolysoi riboosia sekä deoksiribonukleosiditrifosfaatteja (NTP:t ja dNTP:t).TAB5 Alkalinen fosfataasi vaikuttaa 5´ ulkoneviin, 5´ upotettuihin ja tylppoihin päihin.Fosfataasia voidaan käyttää monissa molekyylibiologian sovelluksissa, kuten kloonauksessa tai koettimen päiden leimaamisessa DNA:n tai RNA:n fosforyloituneiden päiden poistamiseksi.Kloonauskokeissa defosforylaatio estää linearisoitua plasmidi-DNA:ta itseligoitumasta.Se voi myös hajottaa sitoutumattomia dNTP:itä PCR-reaktioissa valmistaakseen templaatin DNA-sekvensointia varten.Entsyymi inaktivoidaan täydellisesti ja palautumattomasti kuumentamalla 70 °C:ssa 5 minuuttia, jolloin fosfataasin poistaminen ennen ligaatiota tai pääteleimausta on tarpeetonta.