Ultra Nuclease GMP-laatua
Kissanumero: HC2016A
UltraNuclease GMP-laatua ekspressoidaan ja puhdistetaan Escherichia colissa (E. coli) geneettisesti muokatun ja valmistetun GMP-ympäristöissä.Se voi vähentää solusupernatantin ja solulysaatin viskositeettia tieteellisessä tutkimuksessa, lisätä proteiinien puhdistustehokkuutta ja tehostaa proteiinien toiminnallista tutkimusta.Tuote voi myös vähentää isännän nukleiinihappojäännöksiä pg-luokkaan, mikä parantaa biologisten tuotteiden suorituskykyä ja turvallisuutta sovelluksissa, mukaan lukien viruspuhdistus, rokotteiden valmistus ja proteiini-/polysakkaridilääkkeiden valmistus.Lisäksi tuotetta voidaan käyttää myös estämään ihmisen perifeerisen veren mononukleaarisolujen (PBMC) paakkuuntumista soluterapiassa ja rokotteiden kehittämisessä.
UltraNuclease toimitetaan steriloidun reagenssin muodossa, joka eluoidaan puskurissa (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glyseriiniä) värittömän, läpinäkyvän nesteen muodossa.Tämä tuote on valmistettu GMP-prosessivaatimusten mukaisesti ja toimitetaan nestemäisessä muodossa.
Komponentit
UltraNuclease GMP-laatu (250 U/μl)
Varastointiolosuhteet
Tuote toimitetaan kuivajään kanssa ja sitä voidaan säilyttää -25℃~-15°C:ssa kaksi vuotta.
Jos tuote avataan ja sitä on säilytetty 4℃ yli viikon, suosittelemme suodatustatuotetta mikrobikontaminaation estämiseksi.
Tekniset tiedot
| Expression Host | Rekombinantti E. coli UltraNuclease-geenillä |
| Molekyylipaino | 26,5 kDa |
| sähköpiste | 6.85 |
| Puhtaus | ≥99 % (SDS-PAGE) |
| Tallennuspuskuri | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50 % glyseriini |
|
Yksikön määritelmä | Yhden aktiivisuusyksikön (U) määritelmä on käytetty entsyymimäärämuuta ΔA260:n absorptioarvoa 1,0:lla 30 minuutissa 2,625 ml:ssareaktiojärjestelmä 37 ℃:ssa pH:ssa 8,0 (vastaa täydellistä hajoamista37 μg lohen siittiöiden DNA:ta oligonukleotideiksi). |
Ohjeet
1. Näyte Kokoelma
Kiinnittyneet solut: poista elatusaine, pese solut PBS:llä ja poista supernatantti.
Suspensiosolut: kerää solut sentrifugoimalla, pese solut PBS:llä, sentrifugoi 6 000 asteessa10 min, kerää pelletti.
Escherichia coli: kerää bakteerit sentrifugoimalla, pese kerran PBS:llä, sentrifugoi 8 000 asteessarpm 5 minuuttia ja kerää pelletti.
2. Näytekäsittely
Käsittele kerätyt solupelletit lyysipuskurilla suhteessa massa(g) tilavuuteen(ml)1:(10-20), tai mekaanisin tai kemiallisin menetelmin jäillä tai huoneenlämpötilassa (1 g solupellettiä sisältää n.
109 solua).
3. Entsyymikäsittely
Lisää 1-5 mM MgCl reaktiojärjestelmään ja säädä pH arvoon 8-9.
Lisää UltraNuclease suhteessa 250 yksikköä sulattamaan 1 g solupellettejä, inkuboi 37 ℃:ssa yli 30 minuuttia.Katso "Suositeltu reaktioaika" -lomaketta valitaksesihoidon kesto.
4. Supernatantti Kokoelma
Sentrifugoi nopeudella 12 000 rpm 30 minuuttia ja kerää supernatantti.
Huomautus: Jos liuos on hapan tai emäksinen tai sisältää suuria pitoisuuksia suolaa, pesuaineita taidenaturoivia aineita, lisää entsyymiannosta tai pidennä hoitoaikaa vastaavasti.
Suositeltavat reaktioolosuhteetons
| Parametri | Optimaalinen kunto | Tehokas kunto |
| Mg²+pitoisuus | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Lämpötila | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT-pitoisuus | 0-100 mM | >0 mM |
| Merkaptoetanolipitoisuus | 0-100 mM | >0 mM |
| Yksiarvoinen kationipitoisuus | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfaatti-lon-pitoisuus | 0-10 mM | 0-100 mM |
Suositeltava Reaktio Aika (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease-määrä (lopullinen pitoisuus) | Reaktioaika |
| 0,25 U/ml | > 10 h |
| 2,5 U/ml | > 4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Huomautuksia:
Käytä tarvittavia henkilönsuojaimia, kuten laboratoriotakkia ja käsineitä terveytesi ja turvallisuutesi varmistamiseksi!
