RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Tämä tuote sisältää reaktiopuskuria, RT-Enzymes Mixiä (Bst DNA-polymeraasi ja lämmönkestävä käänteiskopioija), lyofilisoituja suoja-aineita ja kromogeenisiä väriainekomponentteja.Käytä puskuria, reaktioentsyymi ja aluke sekoitetaan ja lisätään malliin;lyofilisoidun suojaaineen lisääminen voi olla suoraa.Se yhdistettiin lyofilisaattoriin ja lyofilisoitiin, ja vain alukkeet ja templaatit lisättiin, kun niitä käytettiin.Tämä pakkaus tarjoaa nopean, selkeän visuaalisen amplifikaation havaitsemisen, mikä negatiivinen reaktio on merkitty punaisella ja positiivinen reaktio muuttuu keltaiseksi.
Komponentti
| Komponentti | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Silmukkavälitteinen vahvistuspuskuri (väriaineen kanssa) | 0,96 ml | 4,80 ml × 2 | 9,60 ml × 10 |
| RT-entsyymisekoitus | 270 μl | 2,70 ml | 2,70 ml × 10 |
| Lyofilisoitu suoja | 0,96 ml x 2 | 9,60 ml × 2 | 9,60 ml × 20 |
Sovellukset
DNA:n tai RNA:n isotermiseen monistukseen.
Varastointiolosuhteet
Kuljetettu kuivajäällä, säilytetty -25 ~ -15 ℃.Vältä toistuvaa jäätymistä ja sulattamista, tuote on voimassa 12 kuukautta.
pöytäkirja
1.Sulata käytettävä reaktiopuskuri huoneenlämpötilassa.Vorteksoi lyhyesti tai käännä putkia ylösalaisin useita kertoja, jotta se sekoittuu perusteellisesti, ja sentrifugoi sitten nesteen keräämiseksi putken pohjalle.
2.Reaktiojärjestelmän valmistus.Tämä reagenssi voidaan valmistaa kahdessa reaktiosysteemissä, nestemäisessä reaktioseoksessa ja lyofilisoidussa järjestelmäseoksessa.
1) Valmista nestemäinen reaktioseos
| Komponentti | Äänenvoimakkuus |
| Silmukkavälitteinen vahvistuspuskuri (väriaineen kanssa) | 10 μl |
| RT-entsyymisekoitus | 2,8 μl |
| 10 × Primer Mixa | 5 μl |
| Mallit DNA/RNA b | × μL |
| Nukleaasiton vesi | Jopa 50 μl |
2) Lyofilisointijärjestelmän sekoitus
① Valmista lyofilisoitu seos
| Komponentti | Äänenvoimakkuus |
| Silmukkavälitteinen vahvistuspuskuri (väriaineen kanssa) | 10 μl |
| Lyofilisoitu suoja | 20 μl |
| RT-entsyymisekoitus | 2,8 μl |
| Nukleaasiton vesi | Jopa 50 μl |
② Lyofilisointi: Valmis seos lyofilisoitiin 50 µl:n järjestelmässä
③ Valmista reaktioseos
| Komponentti | Äänenvoimakkuus |
| Lyofilisoitu sekoitus | 1 kpl |
| 10 × Primer Mixa | 5 μl |
| Mallit DNA/RNA b | × μL |
| Nukleaasiton vesi | Jopa 50 μl |
Huomautuksia:
1) a.10 × Primer Mix: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) b.DEPC:tä (vesiliukoista) suositellaan nukleiinihappotempliin.
1.Inkuboi 65°C:ssa 30-45 minuuttia, jota voidaan pidentää sopivasti värinmuutoksen mukaan. Reaktioaika.
2.Paljaalla silmällä katsottuna keltainen oli positiivinen ja punainen negatiivinen.
Huomautuksia
1.Suolaa saattaa ilmestyä puskuriputken pohjalle, pyörteillä lyhyesti tai käännellä putkia useita kertoja sekoittuakseen perusteellisesti huoneenlämpötilassa.
2.Reaktiolämpötila voidaan optimoida välillä 62 ℃ - 68 ℃ alukkeiden kunnon mukaan.
3.Pakattuja reagensseja ei saa altistaa ilmalle pitkäksi aikaa.
4.Punainen ja keltainen värjäytymisreaktio riippuu reaktiojärjestelmän pH-muutoksesta, älä käytä Tris-nukleiinihappovarastointiliuosta, suositellaan käytettäväksi ddH2O varastoitu nukleiinihappo;
5.Koe tulisi standardoida, mukaan lukien reaktiojärjestelmän valmistus, lyofilisointi ja näytteen käsittely ja näytteen lisäysprosessi;
6.Likaantumisen välttämiseksi on suositeltavaa valmistella reaktiojärjestelmä erittäin puhtaalla pöydällä, muissa Lisää malleja huoneen vetokupuun väärien positiivisten häiriöiden välttämiseksi.
