Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Kuvaus
Cat nro: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix on multipleksinen kvantitatiivinen PCR-sarja, joka perustuu RNA:han templaattina.Kokeessa käänteistranskriptio ja kvantitatiivinen PCR suoritetaan samassa reaktioputkessa, mikä yksinkertaistaa kokeellista toimintaa ja vähentää kontaminaatioriskiä.Puskurin ja entsyymisekoituksen ainutlaatuista muotoilua voidaan käyttää yksivaiheisessa lyofilisoidussa järjestelmässä.Pakkauksessa käytetään lämmönkestävää käänteistranskriptaasia ensimmäisen juosteen cDNA:n tehokkaaseen synteesiin käyttämällä hotstart Taq DNA -polymeraasia kvantitatiiviseen monistamiseen.Se sisältää optimoidun reaktiopuskurin, entsyymien seoksen jne., ja tekijöitä, jotka estävät tehokkaasti epäspesifistä PCR-monistusta ja lisäävät useiden qPCR-reaktioiden monistustehokkuutta, lisättiin, mikä mahdollistaa usean fluoresenssikvantitatiivisen amplifikaation varmistaen samalla alukkeiden monistustehokkuuden.
Komponentit
| Nimi |
| 1. Lyo-puskuri |
| 2. Lyo-entsyymisekoitus |
| 3. Lyo-suoja |
Kuljetusehdotioni
V: Lyo-puskuri ja suojaaine: -25 ~ -15 ℃, säilyvyys on 1 vuosi.
B: Lyo-entsyymisekoitus, 2-8 ℃, säilyvyys 6 kuukautta.
Käyttöohje
1. Reaktiojärjestelmä (Otetaan esimerkkinä 25 μL)
| Komponentit | Tilavuus (μL) | Lopullinen keskittyminen |
| Lyo-puskuri | 6 | 1* |
| Lyo-entsyymisekoitus | 1 | - |
| Lyo-suoja | 8 | - |
| Primer Seos (10 μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Anturisekoitus (10 μM) | 0.5 | 0,05-0,5 uM |
| RNA-malli | 5 | - |
| DEPC H2O | 25 asti | - |
2. Optimoitu pyöräilyprotokolla
1) Vakiopyöräilyprotokolla
| Reaktiovaihe | Lämpötila | Aika | Kierrä | |
| 1 | Käänteinen transkriptio | 50 °Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Alkudenaturaatio | 95 °C | 5 min | 1 |
| 3 | Monistusreaktio | 95 °C | 15 sek | 45 sykliä |
| 60 °Cb | 30 sekuntiac |
2) Fast Cycling Protocol
|
| Reaktiovaihe | Lämpötila | Aika | Kierrä |
| 1 | Käänteinen transkriptio | 50 °Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Alkudenaturaatio | 95 °C | 2 s | 1 |
| 3 | Monistusreaktio | 95 °C | 1 sekunti |
45 sykliä |
| 60 °Cb | 13 sekc |
Huomautus:
a) Käänteinen transkriptio: Lämpötilaksi voidaan valita 42°C tai 50°C 10-15 minuutiksi.
b) Monistusreaktio: Lämpötila säädetään suunniteltujen pohjamaalien Tm-arvon mukaan.
c)Fluoresenssi signaali hankinta: Aseta kokeellinen menettely julkaisun vaatimusten mukaisestiinstrumentin käsikirja.
Tekniset tiedot/tekniset tiedot
| Hot Start | Sisäänrakennettu kuumakäynnistys |
| Havaitsemismenetelmä | Primer-sondin tunnistus |
| PCR-menetelmä | Yksivaiheinen RT-qPCR |
| Näytteen tyyppi | RNA |
Huomautuksia
1. Tämä tuote on tarkoitettu vain tutkimuskäyttöön.
2. Käytä tarvittavia henkilönsuojaimia, kuten laboratoriotakkia ja käsineitä terveytesi ja turvallisuutesi varmistamiseksi!
