CHO HCP ELISA Kit

Luettelonumero: HCP0032A

Pakkaus: 96t

Tässä määrityksessä käytetään yksivaiheista immunosorbentti-ELISA-menetelmää.CHOK1 HCP:tä sisältävät näytteet reagoivat samanaikaisesti HRP-leimatun vuohen anti-CHOK1-vasta-aineen ja ELISA-levylle päällystetyn anti-CHOK1-vasta-aineen kanssa.

Lähetä kysely

Tuotteen Kuvaus

Tuotteen päivämäärä

Tässä määrityksessä käytetään yksivaiheista immunosorbentti-ELISA-menetelmää.Näytteet, jotka sisältävät CHOK1 HCP:tä, reagoivat samanaikaisesti HRP-leimatun vuohen anti-CHOK1-vasta-aineen ja ELISA-levylle päällystetyn anti-CHOK1-vasta-aineen kanssa muodostaen lopulta sandwich-kompleksin kiinteän faasin vasta-aine-HCP-leimatusta vasta-aineesta.Sitoutumaton antigeeni-vasta-aine voidaan poistaa pesemällä ELISA-levy.TMB-substraatti lisätään kuoppaan riittävän reaktion aikaansaamiseksi.Värin kehittyminen pysäytetään pysäytysliuoksen lisäämisen jälkeen ja reaktioliuoksen OD tai absorbanssiarvo aallonpituudella 450/650 nm luetaan mikrolevylukijalla.OD-arvo tai absorbanssiarvo on verrannollinen liuoksen HCP-pitoisuuteen.Tästä voidaan laskea liuoksen HCP-pitoisuus standardikäyrän mukaisesti.

Edellinen: Hiiren genotyyppisarja HCR2021A

Seuraava: Kaksijuosteinen RNA (dsRNA) ELISA KIT HCP0033A

Sovellus

Tätä pakkausta käytetään kvantitatiivisesti havaitsemaan CHOK1-isäntäsolun proteiinijäämien pitoisuus näytteissä.

Ckomponentteja

S/N	Komponentti	Keskittyminen	Varastointiolosuhteet
1	CHOK1 HCP-standardi	0,5 mg/ml	≤–20 ℃
2	Anti-CHO HCP-HRP	0,5 mg/ml	≤-20℃, suojattava valolta
3	TMB	NA	2-8℃, suojattava valolta
4	20 × PBST 0,05 %	NA	2-8℃
5	Pysäytä ratkaisu	NA	RT
6	Mikrolevytiivistimet	NA	RT
7	BSA	NA	2-8℃
8	Korkean adsorption esipinnoitelevyt	NA	2-8℃

Tarvittavat laitteet

Kulutustarvikkeet / laitteet	Valmistus	Luettelo
Mikrolevyn lukija	Molekyylilaitteet	Spectra Max M5, M5e tai vastaava
Lämpösekoitin	Eppendorf	Eppendorf/5355 tai vastaava
Vortex-sekoitin	IKA	MS3 Digital tai vastaava

Säilytys ja vakaus

1.Kuljetus -25~-15°C.

2.Varastointiolosuhteet ovat taulukossa 1 esitetyt;komponentit 1-2 varastoidaan ≤-20°C, 5-6 säilytetään RT,3、4, 7, 8 säilytetään 2-8 ℃:ssa;voimassaoloaika on 12 kuukautta.

Tuotteen parametrit

1.Herkkyys: 1ng/ml

2.Tunnistusalue: 3-100 ng/ml

3.Tarkkuus: Analyysin sisäinen CV ≤ 10 %, määritysten välinen CV ≤ 15 %

4.HCP:n kattavuus: >80 %

5.Spesifisyys: Tämä sarja on universaali, koska se reagoi erityisesti CHOK1 HCP:n kanssa puhdistusprosessista riippumatta.

Reagenssin valmistus

1.PBST 0,05 %

Ota 15 ml 20 × PBST 0,05 % laimennettuna ddH:lla₂O, ja täytettiin 300 ml:ksi.

2.1,0 % BSA

Ota pullosta 1 g BSA:ta ja laimenna 100 ml:aan PBST 0,05 %, sekoita hyvin, kunnes se on täysin liuennut, ja säilytä 2-8 °C:ssa.Valmistettu laimennuspuskuri on voimassa 7 päivää.On suositeltavaa valmistaa tarpeen mukaan.

3.Detektioliuos 2μg/ml

Ota 48 µl 0,5 mg/ml Anti-CHO HCP-HRP:tä ja laimenna 11 952 µl:aan 1 % BSA:ta, jotta saat lopulliseksi pitoisuudeksi 2 µg/ml tunnistusliuosta.

4.QC ja CHOK1 HCP -standardien valmistelu

Putki Ei.	Alkuperäinen liukeneminen	Keskittyminen ng/ml	Äänenvoimakkuus μL	1 % BSA Äänenvoimakkuus μL	kokonaistilavuus μL	Lopullinen keskittyminen ng/ml
A	Vakio	0,5 mg/ml	10	490	500	10 000
B	A	10 000	50	450	500	1 000
S1	B	1 000	50	450	500	100
S2	S1	100	300	100	400	75
S3	S2	75	200	175	375	40
S4	S3	40	150	350	500	12
S5	S4	12	200	200	400	6
S6	S5	6	200	200	400	3
NC	NA	NA	NA	200	200	0
QC	S1	100	50	200	250	20

Taulukko: Laadunvarmistuksen ja standardien valmistelu

Määritysmenettely

1.Valmistele reagenssit edellä kohdassa "Reagenssien valmistelu" kuvatulla tavalla.

2.Ota 50 μL standardeja, näytteitä ja laadunvarmistuksia (katso taulukko 3) kuhunkin kuoppaan ja lisää sitten 100 μL tunnistusliuosta (2 μg/ml);Peitä levy tiivisteaineella ja aseta ELISA-levy lämpösekoittimeen.Inkuboi nopeudella 500 rpm, 25±3 ℃ 2 tuntia.

3.Käännä mikrolevy ylösalaisin pesualtaassa ja hävitä päällysteliuos.Pipetoi 300 µl PBST 0,05 % jokaiseen kuoppaan ELISA-levyn pesemiseksi ja liuoksen hävittämiseksi ja toista pesu 3 kertaa.Käännä lautanen puhtaalle talouspaperille ja taputtele kuivaksi.

4.Lisää 100 µl TMB-substraattia (katso taulukko 1) jokaiseen kuoppaan, sulje ELISA-levy ja inkuboi pimeässä 25 ± 3 ℃:ssa 15 minuuttia.

5.Pipetoi 100 µl pysäytysliuosta kuhunkin kuoppaan.

6.Mittaa absorbanssi aallonpituudella 450/650 nm mikrolevylukijalla.

7.Analysoi tiedot SoftMaxilla tai vastaavalla ohjelmistolla.Piirrä standardikäyrä käyttämällä neljän parametrin logistista regressiomallia.

Esimerkki vakiokäyrästä

HUOMAA: Jos näytteen HCP-pitoisuus ylittää standardikäyrän ylärajan, se on laimennettava kunnolla laimennuspuskurilla ennen testausta.

HUOMAUTUKSIA

Pysäytysliuos on 2 M rikkihappoa, käsittele varovasti roiskeilta!