2×HiF Taq plus Master Mix
Kissanumero: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (väriaineella) on käyttövalmis 2× esisekoitettu liuos, joka sisältää Plus HIF DNA Polymerase, dNTP:t ja optimoidun puskurin.Kaksi monoklonaalista vasta-ainetta huoneenlämpötilassa, jotka estävät polymeraasiaktiivisuutta ja 3'→5'eksonukleaasiaktiivisuutta, lisätään perusseokseen helposti ja erittäin spesifistä Hot Start PCR:ää varten.Laajennustekijä lisätään master-seokseen antamaan entsyymille pitkän fragmentin monistuskapasiteetti, monistuksen pituus voi olla jopa 13 kb, entsyymillä on 5′→3′ DNA-polymeraasiaktiivisuus ja 3′→5′. eksonukleaasiaktiivisuus, sen tarkkuus on 83 kertaa Taq DNA-polymeraasin tarkkuus, joka on 9 kertaa tavalliseen DNA-polymeraasiin verrattuna.Se soveltuu monimutkaisten mallien vahvistamiseen, amplifikaatiotuote on tylppä pää.
2 × HIF Taq plus Master Mix (väriaineella) on nopea ja helppo, korkea herkkyys, vahva spesifisyys, hyvä stabiilisuus jne., reaktiojärjestelmään tarvitsee vain lisätä alukkeita ja templaatteja, ja sitä voidaan vahvistaa kahdella askelprotokolla, yksinkertaistaa kokeellisia vaiheita ja säästää aikaa.Tämä tuote sisältää elektroforeesiindikaattorivärejä, ja PCR-tuotteita voidaan käyttää suoraan elektroforeesiin.Lisäksi tuote sisältää myös erityistä suoja-ainetta, jotta perusseos voi säilyttää vakaan aktiivisuuden toistuvan jäädytyksen ja sulatuksen jälkeen.
Varastointiolosuhteet
Tuotteita tulee säilyttää -25 ~ -15 ℃ 1 vuoden ajan.
Tekniset tiedot
Tuotteen erittely | Master Mix |
Keskittyminen | 2× |
Hot Start | Sisäänrakennettu Hot Start |
Ylitys | Tylsä |
Reaktionopeus | Nopea |
Koko (lopputuote) | Jopa 13 kb |
Kuljetusehdot | Kuivajää |
Tuotetyyppi | Korkealaatuiset PCR-esisekoitukset |
Ohjeet
1.PCR-reaktiojärjestelmä
Komponentit | Tilavuus (μL) |
DNA-malli | Sopiva |
Forward primer (10 μmol/L) | 2.5 |
Reverse Primer (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF Taq plus Master Mix | 25 |
ddH2O | 50:een |
2.Suositeltu eri mallien käyttö
Mallin tyyppi | Monista fragmentteja 1 kb:sta 10 kb:iin |
Genominen DNA | 50 ng-200 ng |
Plasmidi tai virus-DNA | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2,5 µl (Älä ylitä 10 % lopullisesta PCR-reaktiotilavuudesta) |
3.Vahvistusprotokolla
1) Kaksivaiheinen protokolla (monimutkaisuusmalli)
Kierrä vaihe | Temp. | Aika | Pyörät |
Alkudenaturaatio | 98℃ | 3 min | 1 |
Denaturaatio | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
Laajennus | 68℃ | 30 s/kb | |
Lopullinen laajennus | 72℃ | 5 min | 1 |
2) Kolmivaiheinen protokolla (tavallinen protokolla)
Kierrä vaihe | Temp. | Aika | Pyörät |
Alkudenaturaatio | 98℃ | 3 min | 1 |
Denaturaatio | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
Hehkutus | 60℃ | 20 sekuntia | |
Laajennus | 72℃ | 30 s/kb | |
Lopullinen laajennus | 72℃ | 5 min | 1 |
3) Hehkutusgradienttiprotokolla (monimutkaisuusmalli)
Kierrä vaihe | Lämpötila | Aika | Pyörät |
Alkudenaturaatio | 98℃ | 3 min | 1 |
Denaturaatio | 98℃ | 10 sek | 15 (1 ℃ alennus sykliä kohden) |
Gradienttihehkutus | 70-55 ℃ | 20 sekuntia | |
Laajennus | 72℃ | 30 s/kb | |
Denaturaatio | 98℃ | 10 sek |
20 |
Hehkutus | 55℃ | 20 sekuntia | |
Laajennus | 72℃ | 30 s/kb | |
Lopullinen laajennus | 72℃ | 5 min | 1 |
Ominaisuudet eri vahvistusprotokollalla
Protocol | Kaksi askelta | Kolmivaiheinen | Gradienttihehkutus |
Spec. | nopeasti | keskikokoinen | hidas |
Spesifisyys | korkea | keskikokoinen | korkea |
PCR-saanto | keskikokoinen | korkea | keskikokoinen |
Havaintonopeus | korkea | keskikokoinen | korkea |
Huomautuksia
Käytä tarvittavia henkilönsuojaimia, kuten laboratoriotakkia ja käsineitä, varmistaaksesi terveytesi ja turvallisuutesi!