2×PCR Master Mix (ilman väriainetta)
PCR Master Mix on eräänlainen tavanomainen PCR-esisekoitettu liuos, joka on käyttövalmis, sisältäen Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 ja optimoitu puskuri.Reaktion aikana vain aluke ja templaatti voidaan lisätä monistusta varten, mikä yksinkertaistaa suuresti kokeen toimintavaiheita.Tämä tuote sisältää erinomaisia stabilointiaineita ja sitä voidaan säilyttää 3 kuukautta 4 ℃:ssa.PCR-tuotteessa on 3'-dA-uloke, ja se voidaan helposti kloonata T-vektoriin.
Varastointiolosuhteet
Tuotetta tulee säilyttää -25 ℃ ~ -15 ℃ kahden vuoden ajan.
Tekniset tiedot
| Fidelity (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Ylitys | 3′-A |
| Polymeraasi | Taq DNA -polymeraasi |
| Reaktiomuoto | SuperMix tai Master Mix |
| Reaktionopeus | Vakio |
| Tuotetyyppi | PCR Master Mix (2×) |
Ohjeet
1.Reaktiojärjestelmä
| Komponentit | Koko (μL) |
| Malli-DNA | Sopiva |
| Primer 1 (10 μmol/l) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/l) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | 50:een |
2.Vahvistusprotokolla
| Kierrä vaiheet | Lämpötila (°C) | Aika | Pyörät |
| Esidenaturointi | 94 ℃ | 5 minuuttia | 1 |
| Denaturaatio | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Hehkutus | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Laajennus | 72 ℃ | 30-60 s/kb | |
| Lopullinen laajennus | 72 ℃ | 10 minuuttia | 1 |
Huomautuksia:
1) Templaatin käyttö: 50-200 ng genomista DNA:ta;0,1-10 ng plasmidi-DNA:ta.
2) Mg2+pitoisuus: Tämä tuote sisältää 3 mM MgCl2:ta, joka sopii useimpiin PCR-reaktioihin.
3) Hehkutuslämpötila: Katso alukkeiden teoreettinen Tm-arvo.Hehkutuslämpötila voidaan asettaa 2-5 ℃ alemmaksi kuin pohjamaalin teoreettinen arvo.
4) Pidennysaika: Molekyylitunnistukseen suositellaan 30 sekuntia/kb.Geenikloonausta varten 60sekunti/kb on suositeltavaa.
Huomautuksia
1.Turvallisuutesi ja terveytesi vuoksi käytä laboratoriotakkia ja kertakäyttökäsineitä käytön aikana.
2.Vain tutkimuskäyttöön!
